9. Propuesta del uso de microscopía y bioquímica para identificar el desarrollo de la alfa sinucleina en la formación de cuerpos de Lewy.

 


Presentan:

- Acosta Esquivel Miguel Ángel.

- Sánchez Gregorio Cassandra Rubí.

Comentarios

  1. Hola! por parte del equipo 1 les hacemos las siguientes preguntas:
    1.¿Qué anticuerpo utilizarían para el método de Western Blot para detectar la proteína ATG5?
    2.¿De qué zonas de tejido se toma la muestra de microscopía de fluorescencia de campo amplio?
    3.¿Se podría utilizar algún método de imagenología para complementar los hallazgos de la propuesta, aunque tuviera resultados indirectos?

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    1. Hola, gracias por sus preguntas aquí, las respuestas:
      1.-Para detectar la proteína alfa sinucleina que es la proteína que se conglomera en esta demencia usaríamos el anticuerpo conocido como 9E4
      2.-De algunas de las principales areas afectadas más comunmente como por los cuerpos de lewis como pueden ser los ganglios basales, lóbulo occipital, etc.
      3.-Si se podría implementar una como la RMF aunque solo seria útil en un avanzado estado de desarrollo de las conglomeraciones de alfa sinucleina

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  2. Hola somos el equipo 3 y estas son nuestras preguntas:
    ¿Qué anticuerpos se utilizaron en el Western blot y por qué se seleccionaron esos anticuerpos en particular?
    ¿Cómo se llevó a cabo la electroforesis en gel y la transferencia a la membrana?
    ¿Qué opinan sobre incluir la Tomografía Axial Computarizada para observar las afectaciones ocasionadas? ¿Creen que podría ayudar a complementar su propuesta? Si si, ¿de qué manera?

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    1. Hola, aquí nuestras respuestas:
      1.-Se utilizarian principalmente los anticuerpos 9E4 y 1H7 ya que el anticuerpo 9E4 se une a los residuos 122 y 125 de la alfa sinucleina y por otro lado el anticuerpo 1H7 se une a los residuos 91-97 de la alfa sinucleina
      2.-La electroforesis se hizo utilizando el tipo SDS-PAGE y la transferencia se hizo con una membraba de PVDF pues ofrece una mayor resistencia mecánica
      3.-Si, podría ser útil para contrastar las demás técnicas que son in vitro

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  3. De parte del equipo de Valdéz Eduardo y Montecillos Enrique, estas son nuestras preguntas:
    1. ¿Qué especificidad y sensibilidad tiene la prueba de Western Blot para detección de la proteína alfa sinucleína?
    2. En condiciones normales, ¿la proteína alfa sinucleína se concentra mayormente en un sector del tejido nervioso? De ser así, ¿en qué procesos fisiológicos interviene?
    3. En los resultados de la microscopía de campo claro, ¿los cuerpos de Lewy tienden a confundirse con otro tipo de estructuras?
    ¡Excelente trabajo y tema, felicidades!

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    1. Hola, nos alegra que les gustara nuestro trabajo, aquí nuestras respuestas:
      1.-Debido a la falta de investigaciones en lo referente a esta demencia no cintanos con el dato especifico de la sensibilidad de la alfa sinucloide pero dado los anticuerpos utilizados es probable que ambos parámetros sean altos
      2.-Aunque varía usualmente a neuronas vulnerables en areas como los lobulos occipital, parietal, temporal y los ganglios basales. Las afectaciones varían según la zona pero algunos procesos afectados pueden ser el movimiento motor y la percepción visual
      3.-No, debido a la la estructura característica de las de alfa sinucleina es poco probable que puedan ser confundidos

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    2. *la estructura caracteristica de las conglomeraciones

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  4. ¡Hola!

    Les dejo las siguientes preguntas:

    - En la inmunolocalizción, ¿en qué compartimentos celulares se espera que se presenten las alteraciones de la alfa-sinucleína? ¿Qué puede significar ello para la fisiología de la célula?
    - ¿Existen variantes de la alfa-sinucleina que pudieran diferenciarse por Western Blot?

    ¡Saludos!

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    1. Hola profesor, gracias por sus preguntas

      -En uno de los aminoácidos conformantes de la proteína, puede significar en algunos casos y en una variación especifica de la alfa sinucloide mutaciones que pueden hacer que se lleguen a fomar fibrillas de tipo amiloide
      -No a menos de que se tenga un anticuerpo que pueda detectar los desechos o residuos únicos de esa variación de la proteina alfa sinucloide

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  5. Por parte del equipo de Hernández Quintero Diana Sofía, Moctezuma Flores Abraham Ocelot, y
    Rodriguez Gutierrez Luis Angel:
    1-¿Cuáles son las regiones cerebrales en las que se observa la acumulación de esta proteína?
    2-¿Es posible que la afección de cuerpos de Lewy sea consecuencia de alguna medicación que esté recibiendo el paciente a causa de otro padecimiento?
    3-¿Si comparte casi las mismas características con Párkinson entonces se podrían usar los mismos métodos para su diagóstico?

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    1. Aqui nuestras respuestas:
      1.-En areas como los lobulos occipital, parietal, temporal y los ganglios basales
      2.-Es poco probable y hasta el momento no han habido indicios que sugieran esa posibilidad
      3.-Ya que igualmente hay conglomeraciones de alfa sinucleina si es posible

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  6. Holaaa, primero nos gustaría felicitarlos por su presentación, ya que creo que sintetiza muy bien toda la información expuesta, así como sus resultados esperados y los estudios que los sustentan
    1. Si bien no se conoce porque se forman los cuerpos de Lewy, ¿cuáles son algunas teorías al respecto?
    2. ¿Los métodos propuestos nos permitirían poder observar el inicio de la formación de los cuerpos de Lewy y no solo su desarrollo?
    3. ¿Creen que complementarlo con estudio de imagenología nos ayudaría a tener mayor información sobre el desarrollo de la enfermedad y de esta manera poder desarrollar un mejor tratamiento, o incluso poder llegar a hablar de prevención?

    Integrantes
    - Bravo Sánchez Xiomara
    - González Ladrón de Guevara Karen Andrea
    - Guerra Varela Danitzia Victoria Guadalupe
    - Pérez Jaimes Daniela
    - Pillé Gutiérrez Valeria Roberta

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    1. Holaa, muchas gracias, nos alegra mucho que les haya gustado nuestra presentación
      1.-Una de las teorías es que la causa es un gen hereditario, sin embargo, dicha afirmación no ha sido confirmada en ningún aspecto
      2.-Lo más seguro es que si, de hecho es una de las metas que nos gustaría se pudiera alcanzar con esta propuesta
      3.-Puede que si ya que nos ayudaría a contrastar la informacion obtenida de los metodos ya mencionados en el video

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  7. Hola, felicidades por su propuesta, nuestras preguntas son:
    -¿Que alteraciones o mutaciones afectan para la formación de cuerpos de Lewy?
    -¿Cómo se puede diferenciar mediante estás técnicas la enfermedad de cuerpos de Lewy y la de Parkinson?
    -¿Cómo puede ayudar estás técnicas para un diagnóstico temprano y para el tratamiento de esta enfermedad?
    Integrantes:
    Caravantes Aguilar Mónica Irais
    Reyes Díaz Dorian Ali
    Tolentino López Luisa Daniela

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    1. Hola, muchas gracias
      -Estas alteraciones o mutaciones aún no se conocen con claridad pero en cierto tipo de variación uno de los aminoácidos conformantes de sinucloide puede hacer que se lleguen a fomar fibrillas de tipo amiloide propiciando así también la confirmación de los cuerpos de lewy
      -Puramente mediante las técnicas expuestas es complicado de hacer por lo que sería necesario implementar otro tipo de pruebas al igual que estar atentos al tipo de sintomatologia que se presente primero, que en el caso de los cuerpos de lewy, es el deterioro cognitivo
      -Actualmente hay un tipo de enzima (Cyp40) que sirve para deshacer o debilitar las conglomeraciones de alfa sinucloide por lo que caracterizar y conocer el comportamiento de las conglomeraciones permitirá conocer a donde se debe enfocar dicha enzima y el momento adecuado para ello

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  8. Holaa !
    Su video nos parecio muy bien estructurado ya que detalla la informacion con claridad.
    Nuestras prgintas son:
    -¿Qué estructuras serían mayormente pertinentes estudiar en la microscopia de campo claro?
    -¿Podría utilizarse una resonancia magnética funcional o PET para ver la distribución de las proteínas y si es así, sería una mejor opción?
    -¿Cuál técnica sería mejor utilizar cuando apenas se empiezan a formar los cuerpos de Lewy, considerando el grado de invasión?
    Integrantes:
    Barreiro Reynoso Tabatha Valeria
    Heredia Solís Valentina Guadalupe
    Rosas Mendoza Frida Citlali
    Salazar Aguirre Estefany

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    1. Hola! Muchas gracias!

      -Consideramos que convendría estudiar las áreas donde se han reportado mayor concentración de cuerpos de Lewy y sus alrededores para identificar si hay o no presencia de estos, como puede ser el locus coeruleus, la sustancia negra, los ganglios basales y el lóbulo occipital.
      -En el caso de la resonancia magnética más que observar la distribución de proteínas se reflejarían las alteraciones estructurales que se generarían por su agrupación en las distintas regiones. Mientras que en el PET, podrían verse si hay una mayor concentración de proteínas en ciertas áreas cerebrales, de acuerdo al grado de actividad, por lo que, entre ambas técnicas el PET podría sernos de mayor utilidad para observar la distribución de proteínas, aunque para una mejor detección sugerimos que se complemente con las demás técnicas propuestas o con la resonancia magnética.
      -Considerando el grado de invasión consideramos que la técnica más óptima sería la microscopía de fluorescencia, debido a que permite su uso en tejo en vivo comparado con las otras técnicas.

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  9. ¿Qué técnicas podrían ayudar a diferenciar entre un diagnóstico de Parkinson y demencia con cuerpo de Lewy?
    ¿La tinción de H&E es igual de efectiva para teñir los cuerpos de Lewy corticales?
    ¿Qué otra u otras técnicas permitirían ver más detalladamente la distribución de las proteínas?

    Equipo 7
    Hernandez Pérez Andrea Guadalupe
    Jiménez Alfonso Jetzabeth
    Ornelas Muñoz Héctor
    Villa Jiménez Fátima Michelle

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    1. Hola, respondiendo a sus preguntas:

      -Las técnicas que podrían ayudarnos dependiendo de la etapa de la enfermedad podrían ser la resonancia magnética funcional, el PET y la microscopía de con fluorescencia y de campo claro.
      -Sí, la tinción H&E es igual de efectiva en zonas corticales.
      -Otras de las técnicas que permitirían ver a detalle la distribución de proteínas puede ser el PET y la microscopía de contraste de muestra (TEM).

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  10. Holaa, muy buen video, nos ha gustado su explicación, aquí nuestras preguntas:
    1.-¿Pueden interactuar/coexistir la demencia con cuerpo de Lewy con otra enfermedad neurodegenerativa?
    2.-¿Con qué técnica se podría visualizar la forma fibrilar en el soma de grupos selectivos de neuronas vulnerables?
    3.-¿De qué forma se podrían observar las conglomeraciones de cuerpos de Lewy a nivel estructural?

    Integrantes:
    Castro Esquivel Adair
    Herrera Hernández Carolina
    Luna Bedolla Valeria A.

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    1. Hola, muchas gracias, nos alegra que les gustara.

      1.-Sí, la demencia con cuerpos de Lewy puede coexistir con otros tipos de enfermedades como el Alzheimer.
      2.-Con el uso de técnicas como la microscopía de contraste de muestra (TEM) y la microscopía por contraste diferencial de interferencia se podrían observar in vivo las formas fibrilares.
      3.-La resonancia magnética funcional sería el método más cercano para observar las conglomeraciones a nivel estructural.

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  11. Nos gustó su tema ! Tenemos las siguientes preguntas:
    - ¿Qué tipo de lisis celular utilizaron para la técnica Wéstern Blot?
    - Gracias a la investigación de la proteína alfa-sinucleína ¿ actualmente no se puede prevenir ni curar la demencia con cuerpos de Lewy?
    - ¿ Qué lugares estructurales específicos hay más presencia de la proteína alfa-sinucleína en conglomeración ?

    Chávez Camacho Mariana
    Escamilla Lucio Lenny
    García Rojas Luz Adriana
    Ortega Medina Karina

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    1. Hola! Gracias!

      -Se utilizó la lisis ultrasónica o sonicación.
      -Actualmente todavía faltan realizar investigaciones al respecto, sin embargo la enzima Cyp40 parece deshacer y debilitar las conglomeraciones de cuerpos de Lewy, lo cual podría ser una propuesta para curar este tipo de demencia.
      -En la sustancia negra, ganglios basales, locus coeruleus y en lóbulo occipital.

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  12. Hola, buen vídeo, les dejamos las siguientes preguntas:

    1. ¿Cómo unirían todas sus técnicas para llegar a sus objetivos?
    2. En sus preguntas de investigación mencionan al Parkinson, en base a sus técnicas, ¿Cuál nos ayudaría más a determinar los factores que permiten el desarrollo en los grupos de Lewys y en Parkinson, no?
    3. ¿Creen que sería beneficioso unir las técnicas propuestas con técnicas cognitivas-conductuales?

    Equipo:
    Hernández Palacios Paulina
    López Magaña Abi M.
    Pérez Vargas Andrea Karime
    Salinas Lucero Andrés Itzamná

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    1. Hola, gracias (:

      1.Para investigar en un inicio la composición, indicios, ubicación y características de la proteína alfa sinucleína y sus conglomeraciones usaríamos la microscopía de campo claro, la inmunohistoquímica y el western blot. A partir de la información obtenida utilizaríamos la microscopía de fluorescencia para observar el desarrollo de la proteína in vivo y como puede evolucionar para formar los cuerpos de Lewy.
      2.Creemos que la microscopía de fluorescencia nos sería de mayor utilidad para identificar las áreas donde se encuentran las conglomeraciones de proteínas y con ello ver su desarrollo diferenciado entre ambas enfermedades.
      3.Esperamos que con los métodos propuestos se puedan observar e identificar indicios de la formación de cuerpos de Lewy, por lo que la implementación de técnicas cognitivo-conductuales en los primeros momentos donde se detecten las conglomeraciones de la proteína podría resultar beneficioso para el tratamiento de la persona pero haría falta investigar más al respecto y saber que técnicas, en específico, serían las más adecuadas.

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